Прикладное использование сефадексов. Обессоливание растворов ВМС. Определение молекулярной массы

Ответ:

Сефадексы - синтетические производные полисахарида декстрана, в полимерные молекулы которых введены поперечные "сшивки", образующие трёхмерную сетку с порами заданного размера (т. н. молекулярные сита). Обессоливание растворов. С помощью колонки, заполненной сефадексом G-25, можно проводить обессоливание растворов высокомолекулярных соединений. Фракции высокомолекулярных соединений элюируются с внешним объемом колонки, в то время как фракции, содержащие низкомолекулярные соединения, распределяются между подвижной и неподвижной фазами и поэтому движутся с меньшей скоростью. Обессоливание - более быстрый и эффективный метод, чем диализ, и используется, в частности, для удаления фенола из растворов нуклеиновых кислот, сульфата аммония из растворов белков, а также для отделения моносахаридов от полисахаридов и аминокислот от белков. Сефадексы используются для определения молекулярной массы ВМС в тонком слое. Длина пробега белка через тонкий слой сефадекса находится в логарифмической зависимости от его молекулярной массы (рис.1). Рис.1. Зависимость между длиной пробега белковых частиц при гельхроматографии в тонком слое сефадекса G-150 и их молекулярными массами Концентрирование и диализ тесно связаны между собой. При диализе низкомолекулярные вещества удаляются из образца и замещаются буфером. Удаление солей и замену буфера предпочтительней проводить более быстрым методом гельфильтрации. Для этих целей наиболее широко применяется сефадекс Объем образца не должен превышать  объема колонки, скорость элюции - не более  поперечного сечения. С помощью сухого сефадекса (крупнозернистый)